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你知道什么是ELISA試劑盒溫育嗎?
2020-11-17
ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行發(fā)作氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,避免發(fā)作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液,再在其中參加血清標(biāo)本,然后在微型震動器上震動1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物使用液和底物使用液時...
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Elisa試劑盒技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點
2020-11-09
ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標(biāo)記在抗體/抗原分子上,形成酶標(biāo)抗體/酶標(biāo)抗原,稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后,作用于底物使之呈色,根據(jù)顏色的有無和深淺,定位或定量抗原/抗體。ELISA試劑盒是免疫酶技術(shù)的一種,其特點是利用聚苯乙烯微量反應(yīng)板(或球)吸附抗原/抗體,使之固相化,免疫反應(yīng)和酶促反應(yīng)都在其中進行。在每次反應(yīng)后都要反復(fù)洗滌,這既保證了反應(yīng)的定量關(guān)系,也避...
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ELISA試劑盒實驗中血清標(biāo)本宜在新鮮時檢查
2020-11-06
ELISA試劑盒實驗中可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作標(biāo)本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如大便和某些分泌物)。血漿中除尚富含纖維蛋白原和抗凝劑外,別的成份均對等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清天然凝集、縮短后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)查驗中均以血清作為檢查標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可對等運用。血清標(biāo)本可按慣例方法收集,應(yīng)留...
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談?wù)劶毎蛲龅男?yīng)機制
2020-10-28
今天來了解一下細胞凋亡的效應(yīng)機制吧凋亡細胞的特征性表現(xiàn),包括DNA裂解為200bp左右的片段,染色質(zhì)濃縮,細胞膜活化,細胞皺縮,后形成由細胞膜包裹的凋亡小體,然后,這些凋亡小體被其他細胞所吞噬,這一過程大約經(jīng)歷30-60分鐘,Caspase引起上述細胞凋亡相關(guān)變化的全過程尚不*清楚,但至少包括以下三種機制:1凋亡抑制物正常活細胞因為核酸酶處于無活性狀態(tài),而不出現(xiàn)DNA斷裂,這是由于核酸酶和抑制物結(jié)合在一起,如果抑制物被破壞,核酸酶即可激活,引起DNA片段化?,F(xiàn)知caspase...
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ELISA試劑盒的基本原理有這三條,你知道嗎?
2020-10-26
ELISA試劑盒因此含雜質(zhì)較多的抗原也可選用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附聯(lián)絡(luò)的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的效果于。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時),以增加其吸附功能。例如,在檢查抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,ELISA試劑盒而廣泛的固相載體一般不能直接與核酸聯(lián)絡(luò)。換言之,包被就是抗原或抗體聯(lián)絡(luò)到固相載體表面的進程。當(dāng)抗原決定簇...
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ELISA試劑盒洗滌的兩大方法
2020-10-14
洗滌雖不是一個反應(yīng)步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELISA靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。重點分析:ELISA試劑盒洗滌的兩大方法一、浸泡式1.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);3.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;4.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液...
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ELISA試劑盒在試驗過程中需要注意什么
2020-10-12
ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的試驗確診方法。盡管ELISA試劑盒的操作過程看似簡單,但沒做到位的話就會影響試驗的作用。所以在試驗過程中這幾點非常重要:1、重要的洗刷:不充分的洗刷會導(dǎo)致差異和高布景,從而帶來不抱負的試驗結(jié)果。假如未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會添加布景噪音。有必要的話,可添加洗刷液中的鹽濃度,這會阻止非特異結(jié)合反響。假如布景過高,置疑洗刷不行時,能夠測驗添加洗刷次數(shù)。2、關(guān)鍵的關(guān)閉:關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位...
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ELISA試劑盒的選購指南
2020-09-27
目前市場上的ELISA試劑盒質(zhì)量參差不齊,如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要,具體有以下幾點可供參考:一、特異性:ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分,抗體對有關(guān),若抗體對中之一為多抗,另一個必須為單抗,建議使用雙單抗。二、靈敏度:靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的量的能力,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒,如果待檢指標(biāo)量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可選擇高敏的ELISA試劑盒。三、重復(fù)性:科學(xué)實驗講求重復(fù)性,一般ELISA試劑盒,其板內(nèi)和板間...